29 28

Synthèse d’AMPc par les Fibroblastes Effets croisés des composants de (DHA Algae QS5 et EPP^TM)

Traitements

AMPc (pM/mg Prot)

Taux d’AMPc (X contrôle)

2000

1500

1000

500

0 Contrôle DHA EPP^TM VIP^®

Taux de synthèse d’AMPc par les Fibroblastes

Effets croisés des composants de (DHA Algae QS5 et EPP^TM)

Traitements

100 200 300 400 500 600

0 Contrôle

100

410

136

549

DHA EPP^TM VIP^®

Résultats Protocole Traitement des cellules : Trois types cellulaires d’origine humaine ont été utilisés dans cette expérimen- tation, les fibroblastes cutanés, les neurones (SH-SY5Y) et les ostéoblastes (SaOs-2). Les cellules ont été ensemencées dans une plaque de 24 puits à la densité de 100.000 cellules/puits. Les cultures sont alors traitées pour chacune des 3 populations cellulaires comme suit : – 2 puits contrôle sans traitement – 2 puits traités avec DHA Algae QS5 (2mg/ml) – 2 puits traités avec EPP™ (20µg/ml) – 2 puits traités avec (2mg/ml), c’est-à-dire en présence de DHA Algae QS5 et de l’EPP™ Après 2 heures d’incubation, les cultures sont rincées avec du PBS et les cellules sont lysées à l’aide d’une solution HCL (0,1N) qui sera neutralisée par NaOH (0,1N). Les lysats sont centrifugés, aliquotés puis congelés à -20 jusqu’à la mise en œuvre des dosages par compétition des protéines et de l’AMPc à l’aide d’un kit ELISA compétition manufacturé par Enzo (cAMP complete ELISA kit, cat N° ADI-900-163).